First detection of Leishmania of the subgenus viannia in Alipiopsitta xanthops, endemic bird of South America

We report the first molecular detection of Leishmania infection (subgenus Viannia) in the yellow-faced parrot (Alipiopsitta xanthops), at a wildlife rehabilitation center located in the city of Campo Grande, Brazil, an endemic area for leishmaniasis. PCRs targeting kinetoplast DNA (kDNA) and the small subunit of ribosomal RNA of Leishmania spp. were performed, both positive, followed by the sequencing of the amplified region of the SSU rDNA gene, which confirmed the identity of the parasite. This is the first report of success obtained in the use of PCR targeting the IRBP (Interphotoreceptor retinoid-binding protein) gene as an internal control in the molecular diagnosis of pathogens in bird species.

Serological evaluation of Neospora caninum in pregnant women treated at referral center for prenatal screening in Mato Grosso do Sul, Brazil / Avaliação sorológica de Neospora caninum em gestantes atendidas em centro de referência para triagem pré-natal em Mato Grosso do Sul, Brasil

Abstract Neospora caninum is an obligate intracellular protozoan with canids (Canis domesticus, Canis lupus dingo, Canis latrans, Canis lupus) as its definitive hosts. The objective of this study was to detect anti-N. caninum antibodies in pregnant women seen at referral center for prenatal screening in the state of state Mato Grosso do Sul, Brazil. A total of 188 serum samples from pregnant women provided by the Instituto de Pesquisa, Ensino e Diagnósticos da APAE de Campo Grande (IPED/ APAE) were subjected to IFA test and western blot analysis. The samples were divided into three groups: 23/99 samples from the seropositive group for toxoplasmosis were positive for anti-N. caninum IgG antibodies, and 9/99 positive for IgM; in the HIV group, 7/33 were positive for IgG; and in the HIV+toxoplasmosis group, 13/56 were positive for IgG and two positive for IgM. The seropositivity for IgG was assessed by western blot by testing 43 IFA test positive samples using rNcSRS2 (Nc-p43) as antigen. The serological results of the present study suggest that exposure of these pregnant women to the parasite N. caninum and presence of IgM antibodies are indicative of recent infection. Further studies are needed to establish the possibility of active infection.

Resumo Neospora caninum é um protozoário intracelular obrigatório que possui os canídeos (Canis domesticus, Canis lupus dingo, Canis latrans, Canis lupus) como seus hospedeiros definitivos. O objetivo deste trabalho foi detectar anticorpos anti-N. caninum em gestantes, atendidas em centro de referência para triagem pré-natal, em Mato Grosso do Sul, Brasil. Um total de 188 amostras de soro de gestantes, cedidas pelo Instituto de Pesquisa, Ensino e Diagnósticos da APAE de Campo Grande (IPED/ APAE), foram submetidas ao teste de RIFI e western blot para a detecção de anticorpos anti-N. caninum. As amostras foram divididas em três grupos: 23/99 amostras do grupo soropositivo para toxoplasmose demonstraram positividade para anticorpos IgG anti-N. caninum e 9/99 positivos para IgM. No grupo HIV 7/33 apresentaram positividade para IgG. No grupo HIV+Toxoplasmose 13/56 apresentaram positividade para IgG e duas para IgM. A soropositividade para IgG foi avaliada por western blot, testando 43 amostras positivas para RIFI, usando-se rNcSRS2 (Nc-p43) como antígeno. Os resultados sorológicos do presente estudo sugerem exposição dessas gestantes ao parasita N. caninum e a positividade para anticorpos IgM são indicativos de infecção recente. Mais estudos na área são necessários para estabelecer a possibilidade de infecção ativa.

Neonatal sepsis: evaluation of risk factors and histopathological examination of placentas after delivery / Sepse neonatal: avaliação dos fatores de risco e análise histopatológica de placentas após o parto

Neonatal sepsis is a clinical syndrome defined by systemic signs of infection in newborns accompanied by bacteremia. Can be responsible for serious consequences for the newborn child,characterized at the birth as early sepsis or late onset sepsis, with high rate of neonatal morbidity and mortality. Pathological agents such as Escherichia coli (E. coli), Streptococcus agalactiae (S. agalactiae), Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis are most often responsible for intrauterine infections. The objective of this study is to evaluate the factors of neonatal sepsis predisposition in pregnant women through histopathological examination and the apoptotic index of placental tissues and detect DNA of E. coli and S. agalactiae using the Polymerase Chain Reaction (PCR). Histopathological analyses were made and the apoptotic index was determined to verify the levels of possible inflammatory infiltrates and cell death. Placenta samples were collected from November 2013 to May 2014. After DNA extraction, a PCR was performed amplifying the target fragment from the conserved regions of the rpoB (beta-RNA polymerase) polymorphism of E. coli and the factor 1 of S. agalactiae. The apoptosis index was tested with Acridine Orange and the histological procedure with Hematoxylin-Eosin staining. Among 100 samples of placental tissues analyzed by PCR, 48 represented the control group and did not present a risk factor associated with neonatal sepsis, and 52 samples representing the study group had at least one risk factor. Among these 52 samples, 7 (13.4%) had a PCR positive for E. coli. No placenta samples showed a positive PCR for S. agalactiae. The quantification of the apoptotic index did not show statistical significances between the groups and no inflammatory infiltrates were observed. However, histological sections showed fibrinoid necrosis, infarct areas and areas of calcification in all samples. Therefore, the results allow to conclude that the seven patients of experimental group with positive PCR for E. coli had eminent risk factors of neonatal sepsis, and the infection of the urinary tract (UTI) is the main aggravating circumstance. The histopathological examination demonstrated that the risk factors caused significant alterations, producing fibrinoid necrosis and infarcted areas in the placenta, contrary to apoptotic index that didn't differ from the group with unprecedented risk

A sepse neonatal é uma síndrome clínica definida por sinais sistêmicos de infecção em recém-nascidos acompanhados de bacteremia. Pode ser responsável por sérias consequências para o recém-nascido, caracterizadas ao nascimento como sepse precoce ou sepse tardia, com alta taxa de morbidade emortalidade neonatal. Agentes patológicos como Escherichia coli (E. coli), Streptococcus agalactiae (S. agalactiae), Ureaplasma urealyticum e Mycoplasma hominis são mais frequentemente responsáveis por infecções intra-uterinas. O objetivo deste estudo é avaliar os fatores de predisposição da sepse neonatal em gestantes através do exame histopatológico e do índice apoptótico de tecidos placentários e detectar DNA de E. coli e S. agalactiae utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR). Análises histopatológicas foram realizadas e o índice apoptótico foi determinado para verificar os níveis de possíveis infiltrados inflamatórios e morte celular. Amostras de placenta foram coletadas de novembro de 2013 a maio de 2014. Após a extração de DNA, foi realizada uma PCR amplificando o fragmento alvo das regiões conservadas do polimorfismo rpoB (polimerase beta-RNA) de E. coli e o fator 1 de S. agalactiae. O índice de apoptose foi testado com alaranjado de acridina e o procedimento histológico com coloração de hematoxilina-eosina. Entre 100 amostras de tecidos placentários analisados por PCR, 48 representaram o grupo controle e não apresentaram fator de risco associado à sepse neonatal, e 52 amostras representativas do grupo de estudo apresentaram pelo menos um fator de risco. Entre essas 52 amostras, 7 (13,4%) apresentaram PCR positivo para E. coli. Nenhuma amostra de placenta foi positivo para S. agalactiae na PCR. A quantificação do índice apoptótico não mostrou significância estatística entre os grupos e não foram encontrados infiltrados inflamatórios. No entanto, cortes histológicos mostraram necrose fibrinóide, áreas de infarto e áreas de calcificação em todas as amostras. Portanto, os resultados permitem concluir que as sete pacientes do grupo experimental com PCR positivo para E. coliapresentavam fatores de risco eminentes de sepse neonatal, sendo a infecção do trato urinário (ITU), o principal agravante. O exame histopatológico demonstrou que os fatores de risco causaram alterações significativas, produzindo necrose fibrinóide e áreas infartadas na placenta, ao contrário o índice apoptótico que não diferiu do grupo sem precedentes de risco.

Wildlife species, Ixodid fauna and new host records for ticks in an Amazon forest area, Rondônia, Brazil / Espécies de vida selvagem, fauna ixodídica e novos registros de hospedeiros de carrapatos em uma área de Floresta Amazônica, Rondônia, Brasil

Abstract The objective of this work was to evaluate the diversity of ticks associated with free-living animals and to investigate new host records for ticks. Ticks were collected from animals rescued during the flood of the Jamari River in the municipality of Ariquemes, state of Rondônia, North Region of Brazil. A total of 39 animals were captured, out of which 10 were amphibians, 19 were reptiles and 10 were mammals. A total of 127 ticks of the Amblyomma genus were collected from these animals, distributed among seven species: Amblyomma dissimile, Amblyomma geayi, Amblyomma humerale , Amblyomma longirostre, Amblyomma nodosum , Amblyomma rotundatum and Amblyomma varium. In addition, one specimen of Rhipicephalus (Boophilus) microplus was collected. Among these specimens, 85 were adults and 42 were nymphs, with A. rotundatum being the most prevalent species. An Amblyomma spp. larvae was also collected from a lizard (Uranoscodon superciliosus), and one Amblyomma calcaratum and one Amblyomma dubitatum were recovered from the environment, thus totaling 130 ticks. Among the Ixodidae collected from different hosts, we provide the first report for the species A. rotundatum parasitizing Rhinella major, U. superciliosus, Leptophis ahaetulla, Chironius multiventris, and Mastigodryas boddaerti, as well as of A. humerale parasitizing U. superciliosus, A. geayi parasitizing Choloepus didactylus, and Rhipicephalus (B.) microplus parasitizing Alouatta puruensis.

Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade de carrapatos associados à animais de vida livre e investigar novos registros de hospedeiros. Coletas foram feitas em animais resgatados durante a cheia do Rio Jamari, localizado no município de Ariquemes, estado de Rondônia, Região Norte do Brasil. Um total de 39 animais foi capturado, dos quais dez eram anfíbios, 19 eram répteis e dez eram mamíferos. 127 carrapatos do gênero Amblyomma foram coletados destes animais, distribuídos em sete espécies: Amblyomma dissimile , Amblyomma geayi, Amblyomma humerale, Amblyomma longirostre, Amblyomma nodosum, Amblyomma rotundatum e Amblyomma varium. Adicionalmente, um exemplar de Rhipicephalus (Boophilus) microplus foi coletado. Dentre estes espécimes, 85 eram adultos e 42 eram ninfas, com A. rotundatum sendo a espécie mais prevalente. Uma larva de Amblyomma spp. também foi coletada de um lagarto (Uranoscodon superciliosus), um Amblyomma calcaratum e um Amblyomma dubitatum foram recuperados do ambiente, assim totalizando 130 carrapatos. Dentre os ixodídeos coletados de diferentes hospedeiros, este trabalho fornece o primeiro registro da espécie A. rotundatum parasitando Rhinella major, U. superciliosus, Leptophis ahaetulla, Chironius multiventris e Mastigodryas boddaerti, assim como da espécie A. humerale parasitando U. superciliosus , a espécie A. geayi parasitando Choloepus didactylus e R. microplus parasitando Alouatta puruensis .